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猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备

沈红霞 韩秀杰 赵凡凡 张保新 余风艳 王晓杜

沈红霞, 韩秀杰, 赵凡凡, 张保新, 余风艳, 王晓杜. 猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备[J]. 浙江农林大学学报, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
引用本文: 沈红霞, 韩秀杰, 赵凡凡, 张保新, 余风艳, 王晓杜. 猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备[J]. 浙江农林大学学报, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
SHEN Hongxia, HAN Xiujie, ZHAO Fanfan, ZHANG Baoxin, YU Fengyan, WANG Xiaodu. Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
Citation: SHEN Hongxia, HAN Xiujie, ZHAO Fanfan, ZHANG Baoxin, YU Fengyan, WANG Xiaodu. Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015

猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
详细信息
    通信作者: 王晓杜

Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs

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    Corresponding author: WANG Xiaodu
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出版历程
  • 收稿日期:  2012-05-04
  • 修回日期:  2012-06-14
  • 刊出日期:  2013-06-20

猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
    通信作者: 王晓杜

摘要: 猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增该病毒的NS1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS1,转化大肠埃希菌Escherichia co1i BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白,获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白。为了提高表达量,JEV-NS1基因的958~1 245 bp被截短。聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明:JEV-NS1表达量明显提高,纯化后含量达到总蛋白的85%以上。纯化后的蛋白免疫ICR小鼠Mus musculus,制备了小鼠抗JEV-NS1多克隆抗体,western-blotting验证了JEV-NS1的抗原性和抗体的特异性。图6参13

English Abstract

沈红霞, 韩秀杰, 赵凡凡, 张保新, 余风艳, 王晓杜. 猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备[J]. 浙江农林大学学报, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
引用本文: 沈红霞, 韩秀杰, 赵凡凡, 张保新, 余风艳, 王晓杜. 猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备[J]. 浙江农林大学学报, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
SHEN Hongxia, HAN Xiujie, ZHAO Fanfan, ZHANG Baoxin, YU Fengyan, WANG Xiaodu. Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015
Citation: SHEN Hongxia, HAN Xiujie, ZHAO Fanfan, ZHANG Baoxin, YU Fengyan, WANG Xiaodu. Expression and antibody preparation of nonstructural protein 1 for Japanese encephalitis virus from pigs[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2013, 30(3): 396-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.015

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