楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

王改萍; 徐涛; 樊莉丽; 彭方仁; 吕昕; 陈琳月

doi:10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

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楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

王改萍 , 徐涛 , 樊莉丽 , 彭方仁 , 吕昕 , 陈琳月

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王改萍, 徐涛, 樊莉丽, 彭方仁, 吕昕, 陈琳月. 楸树花粉壁蛋白质提取及特异性[J]. 浙江农林大学学报, 2016, 33(1): 65-70. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

引用本文:

王改萍, 徐涛, 樊莉丽, 彭方仁, 吕昕, 陈琳月. 楸树花粉壁蛋白质提取及特异性[J]. 浙江农林大学学报, 2016, 33(1): 65-70. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

WANG Gaiping, XU Tao, FAN Lili, PENG Fangren, Lv Xin, CHEN Linyue. Pollen-wall protein extraction and characteristics of Catalpa bungei[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2016, 33(1): 65-70. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

Citation:

WANG Gaiping, XU Tao, FAN Lili, PENG Fangren, Lv Xin, CHEN Linyue. Pollen-wall protein extraction and characteristics of Catalpa bungei[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2016, 33(1): 65-70. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

1.
南京林业大学林学院，江苏南京 210037

基金项目:

十二五国家科技支撑计划子项目（2012BAD21B03）;江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）

详细信息

作者简介: 王改萍，从事森林培育及植物生理生化研究。

通信作者: 彭方仁，教授，博士，博士生导师，从事用材林及经济林的栽培与利用等研究。

中图分类号: S718.4

Pollen-wall protein extraction and characteristics of Catalpa bungei

1.
College of Forestry, Nanjing Forstry University, Nanjing 210037, Jiangsu, China

Funds:

十二五国家科技支撑计划子项目（2012BAD21B03）;江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）

摘要: 为了进一步研究楸树Catalpa bungei自交不亲和特性，以楸树不同产地植株云台山楸树（CB-1），老山楸树（CB-2）和滇楸Catalpa fargesi f. duclouxii （CF）的花粉为对象，利用普通研磨法及超声波破碎法，研究了适合于花粉壁蛋白质提取的方法。同时采用考马斯亮蓝染色法及聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS?鄄PAGE）比较了不同树种花粉蛋白质质量分数及其主要蛋白质组分。结果表明：超声波破碎法适于花粉壁蛋白质的提取，最佳超声参数为功率400 W，超声时间 3 s次－1，间歇时间 6 s次－1，3个回合，工作120次，相隔5 min回合－1。蛋白质提取液三羟甲基氨基甲烷（Tris-HCl）的pH 7.8最佳。不同树种的花粉壁蛋白质质量分数表现为滇楸最高，云台山楸树和老山楸树较低。蛋白质组分研究表明：各树种花粉共有蛋白质有26个，特异蛋白质为连楸53.8 kD，35.0 kD，23.4 kD，26.5 kD；老楸53.8 kD，38.5 kD，23.4 kD；滇楸38.5 kD，26.5 kD。图6表1参18
- 植物学 /
- 楸树 /
- 超声波破碎法 /
- 蛋白质 /
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
Abstract: The research was conducted to further reveal the self-incompatibility that exists extensively Catalpa bungei and to evaluate the best way to extract pollen-wall protein of Catalpa, including the Catalpa bungei plants CB-1 from Yuntaishan National Forest Park of Lianyungang and CB-2 from Laoshan Forest of Nanjing and Catalpa fargesii f. duclouxii （CF） using incorporation and ultrasonication. Also, the content and component of pollen-wall protein from different varieties was compared by the Coomassie Blue Staining Method and SDS （sodium dodecyl sulfate）-polyacrylamide gel electrophoresis （PAGE）. Results showed that the relative optimization method to extract pollen-wall protein of C. bungei was ultrasonication with the optimal parameters being: ultrasonication at 400 W power for 3 s every 6 s for 3 rounds taking 120 duplications at an interval of 5 min. The optimal pH value to extract pollen-wall protein was pH 7.8（F＞F0.05）. For pollen-wall protein content, CF was higher（F＞F0.01） than both CB-1 and CB-2. From the pollen of these three catalpas, 26 proteins were found. Molecular weight of the specific proteins for CB-1 were 53.8 kDa, 35.0 kDa, 23.4 kDa, and 26.5 kDa; for CB-2 they were 53.8 kDa, 38.5 kDa, and 23.4 kDa; and for CF they were 8.5 kDa and 26.5 kDa.［Ch, 6 fig. 1 tab. 18 ref.］
- botany /
- Catalpa bungei /
- ultrasonication /
- protein /
- SDS-PAGE

[1]	王改萍, 王晓聪, 章雷, 张晨, 刘彬. 楸树扦插过程中插穗内含物变化分析 . 浙江农林大学学报, 2021, 38(2): 296-303. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200313
[2]	何自强, 张惠玲, 杨正雄. 响应面优化超声波辅助[Bmim]Cl-K₂HPO₄双水相提取黄秋葵多糖 . 浙江农林大学学报, 2020, 37(3): 547-555. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20190339
[3]	周佳平, 林新春, 徐英武. 拟南芥SEPALLATA3蛋白质原核表达与纯化 . 浙江农林大学学报, 2014, 31(1): 14-18. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.01.003
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[5]	王秀荣, 丁贵杰, 刘烈志, 李平. 罗甸麻疯树开花习性及花的时空分布特点 . 浙江农林大学学报, 2012, 29(3): 388-393. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.03.010
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[7]	何勇清, 方佳, 余敏芬, 方仲相, 江波, 潘寅辉, 郑炳松. 植物质膜内在水通道蛋白PIPs的分子生物学研究进展 . 浙江农林大学学报, 2012, 29(3): 446-452. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.03.020
[8]	张小果, 乔桂荣, 李翠云, 刘明英, 蒋晶, 李海营, 邱文敏, 卓仁英. 旱柳根系蛋白质双向电泳体系的建立 . 浙江农林大学学报, 2011, 28(4): 653-661. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2011.04.021
[9]	马进, 刘志高, 郑钢. 差异蛋白质组学及其在植物盐胁迫响应研究中的应用 . 浙江农林大学学报, 2011, 28(1): 139-143. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2011.01.022
[10]	苏小菱, 马丹丹, 李根有, 刘西. 浙江省珍稀濒危植物细果秤锤树的种群数量监测报告 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(1): 142-144.
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链接本文:
https://zlxb.zafu.edu.cn/article/doi/10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

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楸树花粉壁蛋白质提取及特异性

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

1. 南京林业大学林学院，江苏南京 210037

基金项目:

十二五国家科技支撑计划子项目（2012BAD21B03）;江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）

作者简介:
王改萍，从事森林培育及植物生理生化研究。

通信作者: 彭方仁，教授，博士，博士生导师，从事用材林及经济林的栽培与利用等研究。

收稿日期: 2015-03-02
修回日期: 2015-06-02
刊出日期: 2016-02-20

中图分类号: S718.4

关键词:

摘要: 为了进一步研究楸树Catalpa bungei自交不亲和特性，以楸树不同产地植株云台山楸树（CB-1），老山楸树（CB-2）和滇楸Catalpa fargesi f. duclouxii （CF）的花粉为对象，利用普通研磨法及超声波破碎法，研究了适合于花粉壁蛋白质提取的方法。同时采用考马斯亮蓝染色法及聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS?鄄PAGE）比较了不同树种花粉蛋白质质量分数及其主要蛋白质组分。结果表明：超声波破碎法适于花粉壁蛋白质的提取，最佳超声参数为功率400 W，超声时间 3 s次－1，间歇时间 6 s次－1，3个回合，工作120次，相隔5 min回合－1。蛋白质提取液三羟甲基氨基甲烷（Tris-HCl）的pH 7.8最佳。不同树种的花粉壁蛋白质质量分数表现为滇楸最高，云台山楸树和老山楸树较低。蛋白质组分研究表明：各树种花粉共有蛋白质有26个，特异蛋白质为连楸53.8 kD，35.0 kD，23.4 kD，26.5 kD；老楸53.8 kD，38.5 kD，23.4 kD；滇楸38.5 kD，26.5 kD。图6表1参18

English Abstract

Pollen-wall protein extraction and characteristics of Catalpa bungei

1. College of Forestry, Nanjing Forstry University, Nanjing 210037, Jiangsu, China

Funds:

十二五国家科技支撑计划子项目（2012BAD21B03）;江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）

Received Date: 2015-03-02
Rev Recd Date: 2015-06-02
Publish Date: 2016-02-20

Keywords:

Abstract: The research was conducted to further reveal the self-incompatibility that exists extensively Catalpa bungei and to evaluate the best way to extract pollen-wall protein of Catalpa, including the Catalpa bungei plants CB-1 from Yuntaishan National Forest Park of Lianyungang and CB-2 from Laoshan Forest of Nanjing and Catalpa fargesii f. duclouxii （CF） using incorporation and ultrasonication. Also, the content and component of pollen-wall protein from different varieties was compared by the Coomassie Blue Staining Method and SDS （sodium dodecyl sulfate）-polyacrylamide gel electrophoresis （PAGE）. Results showed that the relative optimization method to extract pollen-wall protein of C. bungei was ultrasonication with the optimal parameters being: ultrasonication at 400 W power for 3 s every 6 s for 3 rounds taking 120 duplications at an interval of 5 min. The optimal pH value to extract pollen-wall protein was pH 7.8（F＞F0.05）. For pollen-wall protein content, CF was higher（F＞F0.01） than both CB-1 and CB-2. From the pollen of these three catalpas, 26 proteins were found. Molecular weight of the specific proteins for CB-1 were 53.8 kDa, 35.0 kDa, 23.4 kDa, and 26.5 kDa; for CB-2 they were 53.8 kDa, 38.5 kDa, and 23.4 kDa; and for CF they were 8.5 kDa and 26.5 kDa.［Ch, 6 fig. 1 tab. 18 ref.］

王改萍, 徐涛, 樊莉丽, 彭方仁, 吕昕, 陈琳月. 楸树花粉壁蛋白质提取及特异性[J]. 浙江农林大学学报, 2016, 33(1): 65-70. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009

引用本文:

王改萍, 徐涛, 樊莉丽, 彭方仁, 吕昕, 陈琳月. 楸树花粉壁蛋白质提取及特异性[J]. 浙江农林大学学报, 2016, 33(1): 65-70. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.009