青杨双向电泳实验体系的建立

陈国良; 蒋晶; 乔桂荣; 金梁; 孙月华; 杨晔; 周婧; 卓仁英

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青杨双向电泳实验体系的建立

陈国良 , 蒋晶 , 乔桂荣 , 金梁 , 孙月华 , 杨晔 , 周婧 , 卓仁英

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陈国良, 蒋晶, 乔桂荣, 金梁, 孙月华, 杨晔, 周婧, 卓仁英. 青杨双向电泳实验体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2009, 26(5): 644-651.

引用本文:

陈国良, 蒋晶, 乔桂荣, 金梁, 孙月华, 杨晔, 周婧, 卓仁英. 青杨双向电泳实验体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2009, 26(5): 644-651.

CHEN Guo-liang, JIANG Jing, QIAO Gui-rong, JIN Liang, SUN Yue-hua, YANG Ye, ZHOU Jing, ZHUO Ren-ying. Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2009, 26(5): 644-651.

Citation:

CHEN Guo-liang, JIANG Jing, QIAO Gui-rong, JIN Liang, SUN Yue-hua, YANG Ye, ZHOU Jing, ZHUO Ren-ying. Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2009, 26(5): 644-651.

青杨双向电泳实验体系的建立

陈国良^1,2,
蒋晶¹,
乔桂荣¹,
金梁²,
孙月华²,
杨晔¹,
周婧¹,
卓仁英^1,

1.
中国林业科学研究院亚热带林业研究所，浙江富阳 311400;
2.
兰州大学草地农业科技学院，甘肃兰州 730020

详细信息

通信作者: 卓仁英

Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis

1.
Research Institute of Subtropical Forestry，The Chinese Academy of Forestry，Fuyang 311400，Zhejiang，China;
2.
College of Pastoral Agriculture Science and Technology，Lanzhou University，Lanzhou 730020，Gansu，China

More Information

Corresponding author: ZHUO Ren-ying

摘要: 用改良丙酮沉淀法、三氯乙酸（TCA）-丙酮沉淀法和酚抽法抽提青杨Populus cathayana的蛋白质，分别获得了437，603和721个蛋白斑点，以酚抽法提取的分离纯化方法效果最佳，不仅能很好地提取蛋白,而且能有效去除样品中的盐分。通过比较，分析了双向电泳不同条件对电泳结果的影响，确立了300 μg·IPG胶条－1的最佳上样量、90 000 V·h的聚焦时间以及20 min平衡时间的双向电泳条件。研究还比较了氯化钠胁迫前后双向电泳图谱差异，发现有46个蛋白点存在差异，其中10个下调，36个上调（4个新诱导表达）。图9参24
- 植物学 /
- 氯化钠胁迫 /
- 蛋白质组学 /
- 双向电泳 /
- 青杨
Abstract: Salt stress is one of the major abiotic stressed over the world. Most of the researchs were foucsed on improve the ability of plant species living in salt soil. Two-dimesional gel electrophoresis（2-DE）is one of the most useful methods in proteins research. To determine total protein extraction efficiency from Populus cathayana with two-dimensional electrophoresis （2-DE） analysis，three protein extraction methods （phenol extraction，improved acetone precipitation method，and TCA-acetone precipitation method） were compared. Electrophoresis conditions and leafy proteomics of P. cathayana with salt stress were also analyzed. Results showed that the three protein extraction methods generated 437，603，and 721 protein spots with the phenol extraction method more effectively removing salt from the protein sample，generating more protein spots，and giving clearer background for the 2-DE map. The results showed that condition of 300 μg per IPG gel，20 min equilibrium time，90 000 V·h IEF time was the suitable treatment. Also，the leafy proteomics analysis revealed that 10 protein spots was down-regulators，32 protein spots was up?-regulators，and 4 new protein spots was induced by salt stress. These proteins may be important response to salt stress. ［Ch，9 fig. 24 ref.］
- botany /
- NaCl stress /
- proteomics /
- two-dimensional electrophoresis （2-DE） /
- Populus cathayana

[1]	沈徐悦, 张浪, 陈蓉蓉, 申亚梅, 金荷仙. 盐胁迫对望春玉兰幼苗形态和相关生理指标的影响 . 浙江农林大学学报, 2021, 38(2): 289-295. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200449
[2]	李叶华, 陈爽, 赵冰. 铝胁迫对绣球组培苗生长及生理特性的影响 . 浙江农林大学学报, 2020, 37(6): 1064-1070. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200121
[3]	高帆, 谢玥, 沈妍秋, 雷芝, 王秀, 夏惠, 梁东. 外源褪黑素对氯化钠胁迫下美味猕猴桃实生苗抗氧化物酶和渗透调节物质的影响 . 浙江农林大学学报, 2018, 35(2): 291-297. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2018.02.013
[4]	叶欣, 谢云, 茹华莎, 洪双华. 浙江红山茶种子的生物学特性 . 浙江农林大学学报, 2015, 32(4): 572-577. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.04.012
[5]	何奇江, 李楠, 傅懋毅, 周文伟, 王波. 氯化钠胁迫对雷竹根系活力和细胞膜透性的影响 . 浙江农林大学学报, 2013, 30(6): 944-949. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.06.021
[6]	申亚梅, 钱超, 范义荣, 童再康. 12种（包括3品种）木兰属植物花粉形态学研究 . 浙江农林大学学报, 2012, 29(3): 394-400. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.03.011
[7]	何勇清, 方佳, 余敏芬, 方仲相, 江波, 潘寅辉, 郑炳松. 植物质膜内在水通道蛋白PIPs的分子生物学研究进展 . 浙江农林大学学报, 2012, 29(3): 446-452. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.03.020
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[9]	张小果, 乔桂荣, 李翠云, 刘明英, 蒋晶, 李海营, 邱文敏, 卓仁英. 旱柳根系蛋白质双向电泳体系的建立 . 浙江农林大学学报, 2011, 28(4): 653-661. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2011.04.021
[10]	孔红, 成仿云. 滇牡丹分类处理的细胞学与分子生物学证据 . 浙江农林大学学报, 2010, 27(4): 601-605. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2010.04.021
[11]	隋德宗, 王保松, 施士争, 教忠意. 盐胁迫对灌木柳无性系幼苗生长及光合作用的影响 . 浙江农林大学学报, 2010, 27(1): 63-68. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2010.01.010
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https://zlxb.zafu.edu.cn/article/id/492

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青杨双向电泳实验体系的建立

1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所，浙江富阳 311400;

2. 兰州大学草地农业科技学院，甘肃兰州 730020

通信作者: 卓仁英

刊出日期: 2009-10-20

关键词:

摘要: 用改良丙酮沉淀法、三氯乙酸（TCA）-丙酮沉淀法和酚抽法抽提青杨Populus cathayana的蛋白质，分别获得了437，603和721个蛋白斑点，以酚抽法提取的分离纯化方法效果最佳，不仅能很好地提取蛋白,而且能有效去除样品中的盐分。通过比较，分析了双向电泳不同条件对电泳结果的影响，确立了300 μg·IPG胶条－1的最佳上样量、90 000 V·h的聚焦时间以及20 min平衡时间的双向电泳条件。研究还比较了氯化钠胁迫前后双向电泳图谱差异，发现有46个蛋白点存在差异，其中10个下调，36个上调（4个新诱导表达）。图9参24

English Abstract

Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis

1. Research Institute of Subtropical Forestry，The Chinese Academy of Forestry，Fuyang 311400，Zhejiang，China;

2. College of Pastoral Agriculture Science and Technology，Lanzhou University，Lanzhou 730020，Gansu，China

Corresponding author: ZHUO Ren-ying

Publish Date: 2009-10-20

Keywords:

botany /
NaCl stress /
proteomics /
two-dimensional electrophoresis （2-DE） /
Populus cathayana

Abstract: Salt stress is one of the major abiotic stressed over the world. Most of the researchs were foucsed on improve the ability of plant species living in salt soil. Two-dimesional gel electrophoresis（2-DE）is one of the most useful methods in proteins research. To determine total protein extraction efficiency from Populus cathayana with two-dimensional electrophoresis （2-DE） analysis，three protein extraction methods （phenol extraction，improved acetone precipitation method，and TCA-acetone precipitation method） were compared. Electrophoresis conditions and leafy proteomics of P. cathayana with salt stress were also analyzed. Results showed that the three protein extraction methods generated 437，603，and 721 protein spots with the phenol extraction method more effectively removing salt from the protein sample，generating more protein spots，and giving clearer background for the 2-DE map. The results showed that condition of 300 μg per IPG gel，20 min equilibrium time，90 000 V·h IEF time was the suitable treatment. Also，the leafy proteomics analysis revealed that 10 protein spots was down-regulators，32 protein spots was up?-regulators，and 4 new protein spots was induced by salt stress. These proteins may be important response to salt stress. ［Ch，9 fig. 24 ref.］

陈国良, 蒋晶, 乔桂荣, 金梁, 孙月华, 杨晔, 周婧, 卓仁英. 青杨双向电泳实验体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2009, 26(5): 644-651.

引用本文:

陈国良, 蒋晶, 乔桂荣, 金梁, 孙月华, 杨晔, 周婧, 卓仁英. 青杨双向电泳实验体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2009, 26(5): 644-651.

Citation:

CHEN Guo-liang, JIANG Jing, QIAO Gui-rong, JIN Liang, SUN Yue-hua, YANG Ye, ZHOU Jing, ZHUO Ren-ying. Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2009, 26(5): 644-651.

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青杨双向电泳实验体系的建立

通信作者: 卓仁英

Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis

Corresponding author: ZHUO Ren-ying

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青杨双向电泳实验体系的建立

1. 中国林业科学研究院 亚热带林业研究所，浙江 富阳 311400; 2. 兰州大学 草地农业科技学院，甘肃 兰州 730020

通信作者: 卓仁英

English Abstract

Populus leafy proteomics with NaCl stress using two-dimensional electrophoresis analysis

1. Research Institute of Subtropical Forestry，The Chinese Academy of Forestry，Fuyang 311400，Zhejiang，China; 2. College of Pastoral Agriculture Science and Technology，Lanzhou University，Lanzhou 730020，Gansu，China

Corresponding author: ZHUO Ren-ying

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1. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所，浙江富阳 311400;

2. 兰州大学草地农业科技学院，甘肃兰州 730020

1. Research Institute of Subtropical Forestry，The Chinese Academy of Forestry，Fuyang 311400，Zhejiang，China;

2. College of Pastoral Agriculture Science and Technology，Lanzhou University，Lanzhou 730020，Gansu，China