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褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较

张海强 陈建明 张珏锋

张海强, 陈建明, 张珏锋. 褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
引用本文: 张海强, 陈建明, 张珏锋. 褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
ZHANG Haiqiang, CHEN Jianming, ZHANG Juefeng. Extraction methods for mycoprotein, a yeast-like symbiote isolated from brown planthopper, Nilaparvata lugens, in rice[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
Citation: ZHANG Haiqiang, CHEN Jianming, ZHANG Juefeng. Extraction methods for mycoprotein, a yeast-like symbiote isolated from brown planthopper, Nilaparvata lugens, in rice[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002

褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
基金项目: 

国家自然科学基金资助项目(30771411,31272040);浙江省自然科学基金资助项目(LY13C140008)

详细信息
    作者简介: 张海强,从事褐飞虱抗药性机制研究。
    通信作者: 陈建明,研究员,从事水稻害虫抗药性监测、抗性机制与抗性治理技术研究。
  • 中图分类号: S476

Extraction methods for mycoprotein, a yeast-like symbiote isolated from brown planthopper, Nilaparvata lugens, in rice

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出版历程
  • 收稿日期:  2014-06-14
  • 修回日期:  2014-09-15
  • 刊出日期:  2015-04-20

褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
    基金项目:

    国家自然科学基金资助项目(30771411,31272040);浙江省自然科学基金资助项目(LY13C140008)

    作者简介:

    张海强,从事褐飞虱抗药性机制研究。

    通信作者: 陈建明,研究员,从事水稻害虫抗药性监测、抗性机制与抗性治理技术研究。
  • 中图分类号: S476

摘要: 为了筛选出适合褐飞虱Nilaparvata lugens类酵母共生菌蛋白质提取的细胞破碎方法,选择超声波破碎法、反复冻融法和液氮研磨法等3种细胞破碎方法提取共生菌吡虫啉敏感菌株和抗性菌株蛋白质。结果表明:菌体显微形态观察发现,使用超声波破碎法和液氮研磨法处理类酵母共生菌的细胞破碎效果均优于反复冻融法,处理后菌体分布均匀,破碎彻底;72 h是提取菌体蛋白质的最佳培养时间。定量分析表明:用超声波破碎法提取蛋白质质量浓度最高,液氮研磨法次之,反复冻融法提取蛋白质质量浓度的效果最差,各方法所提蛋白质质量浓度差异显著(P<0.05)。培养72 h后,超声波破碎法、液氮研磨法和反复冻融法提取的蛋白质质量浓度分别为2.82 gL-1,2.62 gL-1和2.12 gL-1(敏感菌株)及2.64 gL-1,2.53 gL-1和2.05 gL-1(抗性菌株)。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析发现:超声波破碎法获得的蛋白质不仅得率高,且条带清晰,丰度好。液氮研磨法虽得率高,但蛋白质部分降解,条带不清晰;而反复冻融法获得的蛋白质得率最低。超声波破碎法更适合于褐飞虱类酵母共生菌的蛋白质提取,该研究为后续蛋白质的双向电泳实验和分离差异蛋白质提供技术支撑。图4表1参22

English Abstract

张海强, 陈建明, 张珏锋. 褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
引用本文: 张海强, 陈建明, 张珏锋. 褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
ZHANG Haiqiang, CHEN Jianming, ZHANG Juefeng. Extraction methods for mycoprotein, a yeast-like symbiote isolated from brown planthopper, Nilaparvata lugens, in rice[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002
Citation: ZHANG Haiqiang, CHEN Jianming, ZHANG Juefeng. Extraction methods for mycoprotein, a yeast-like symbiote isolated from brown planthopper, Nilaparvata lugens, in rice[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(2): 173-180. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.02.002

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