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竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用

叶碧欢 陈友吾 舒金平 张威 张亚波 李海波 宋其岩

叶碧欢, 陈友吾, 舒金平, 张威, 张亚波, 李海波, 宋其岩. 竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用[J]. 浙江农林大学学报. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
引用本文: 叶碧欢, 陈友吾, 舒金平, 张威, 张亚波, 李海波, 宋其岩. 竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用[J]. 浙江农林大学学报. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
YE Bihuan, CHEN Youwu, SHU Jinping, ZHANG Wei, ZHANG Yabo, LI Haibo, SONG Qiyan. Screening and application of reference genes for qRT-PCR in bamboo wireworm[J]. Journal of Zhejiang A&F University. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
Citation: YE Bihuan, CHEN Youwu, SHU Jinping, ZHANG Wei, ZHANG Yabo, LI Haibo, SONG Qiyan. Screening and application of reference genes for qRT-PCR in bamboo wireworm[J]. Journal of Zhejiang A&F University. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492

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竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
基金项目: 浙江省自然科学基金资助项目(LQ19C160006);浙江省省属科研院所资助项目(2019F1068-1)
详细信息
    作者简介: 叶碧欢,博士,从事森林保护研究。E-mail: 393938188@qq.com
    通信作者: 宋其岩,助理研究员,从事森林培育研究。E-mail: zjlktg@163.com
  • 中图分类号: S763.38

Screening and application of reference genes for qRT-PCR in bamboo wireworm

  • 摘要:   目的   筛选平沙绿僵菌Metarhizium pingshaense侵染条件下筛胸梳爪叩甲Melanotus cribricollis幼虫被稳定表达的内参基因,为该竹林金针虫相关基因的表达研究奠定基础。   方法   基于筛胸梳爪叩甲幼虫的转录组数据,利用实时荧光定量PCR扩增特异性引物,分析相关性和扩增效率;利用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件评估筛选出的6个候选内参基因(β-actinGAPDHα-tubulinRPL13αRPS3、RPS27a),并验证其表达稳定性。   结果   GeNorm分析结果显示:PRS27aRPS3的表达最稳定,随后依次是α-tubulinRPL13αβ-actinGAPDH;最适合的内参基因数目为2。NormFinder分析结果显示:RPL13α的表达最稳定,随后依次是α-tubulinRPS3、RPS27aβ-actinGAPDH。BestKeeper分析结果显示:β-actinGAPDHP值>0.5,不适合作为本试验条件下的内参基因。不同软件分析得出的候选内参排序存在一定差异。综合分析和表达稳定性验证表明PRS27aRPS3是最佳内参基因,6个目的基因的表达水平变化趋势均基本一致。   结论   PRS27aRPS3是研究平沙绿僵菌侵染的竹林金针虫相关基因表达的最佳内参基因。图3表3参27
  • 图  1  总RNA电泳图

    Figure  1  Electrophoretogram of total RNA

    图  2  筛胸梳爪叩甲幼虫候选内参基因的Ct值分析

    Figure  2  Ct value analysis of candidate reference genes of Melanotus cribricollis larvae

    图  3  PRS27aRPS3为内参时6个目的基因不同处理时间下的相对表达量

    对照组的相对表达量设定为1 。不同小写字母表示以RPL27a为内参时差异显著(P<0.05),不同大写字母表示以PRS3为内参时差异显著(P<0.05)

    Figure  3  Expression analysis of six target genes under different processing times calibrated by PRS27a and RPS3 as reference genes

    表  1  本实验所用qRT-PCR引物信息

    Table  1.   Informations of qRT-PCR primers used in this study

    基因引物序列产物长度/bp扩增效率/%R2
    β-actinF:GGATACCTCTTTTGCTCTGGG,R:ATCAGGGTGTCATGGTTGG 75112.480.993
    GAPDHF:CTACTCATGGTCGTTACAAGGG,R:TTCTACAACGTATTCAGCTCCAG140101.790.993
    α-tubulinF:GAAGCTCGTGAAGATTTGGC,R:ACCTTCGCCTTCTCCTTCTC137100.630.996
    RPL13αF:CTGAGGAAGAGCGTAAGGTG,R:TCAGCACGAGCCTTTCTTAAG145106.970.990
    RPS27aF:CTTGTCCTGAATCTTTGCCTTG,R:GTTCTTTTGGTAGCGTGTCATG146 96.200.998
    RPS3F:CAATAGCGCACAAACCACG,R:TGTATTGGGTGAAAAGGGAAGG128111.930.992
    PGRPF:TGTCGTACTTCTGGCTATCATTG,R:TGTGATGGAGGGTTTACTTGC123 88.690.989
    PrxF:CTATCCCTTAGACTTCACCTTCG,R:ATTTCTCCCAAACCTCCCTG 171106.670.996
    SDR(1)F:CGGCATTGACGGAAACTTTAC,R:GGTTTCCACAGACTTTTGCG126109.160.995
    SDR(2)F:AGGTGCTAGTTCGGGAATTG,R:CGTGTAATTTGCCAGGTTTTCC140 99.490.997
    SDR(3)F:GGATTACGAGCATAAGTCCTGG,R:CGGCGATGTCTTCAGATTTTAAC126106.580.996
    SDR(4)F:TTAGGGTTTCAGTCAAGGCAG,R:GAAGCCGTCCAAGATATGAAAG148 93.340.994
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    表  2  利用BestKeeper软件评价候选内参基因的表达稳定性

    Table  2.   Stability of candidate reference genes based on BestKeeper analysis

    基因GeNormNormFinderBestKeeper
    稳定值排名稳定值排名SDP排名
    β-actin0.39140.24450.270.3136
    GAPDH0.42650.29360.160.2615
    α-tubulin0.24220.17720.240.0424
    RPL13α0.31930.16410.320.0243
    RPS27a0.19710.20640.350.0122
    RPS30.19710.20230.390.0021
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    表  3  内参基因的最佳数量评估

    Table  3.   Determination of the optimal number of reference genes for normalization

    Vn/n+1配对变异值Vn/n+1配对变异值
    V2/30.084V4/50.092
    V3/40.092V5/60.074
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  • [1] 邓顺, 舒金平, 王浩杰. 筛胸梳爪叩甲幼虫寄主调查及其土壤空间分布[J]. 昆虫知识, 2010, 47(5): 983 − 987.

    DENG Shun, SHU Jinping, WANG Haojie. Investigation of host rang of wireworms (Melanotus cribricollis) and their spatial distribution in soil [J]. Chin Bull Entomol, 2010, 47(5): 983 − 987.
    [2] 舒金平, 滕莹, 陈文强, 等. 筛胸梳爪叩甲的防治技术研究[J]. 林业科学研究, 2012, 25(5): 620 − 625. doi:  10.3969/j.issn.1001-1498.2012.05.013

    SHU Jinping, TENG Ying, CHEN Wenqiang, et al. Control techniques of Melanotus cribricollis (Coleoptera: Elateridae) [J]. For Res, 2012, 25(5): 620 − 625. doi:  10.3969/j.issn.1001-1498.2012.05.013
    [3] SCHOLTE E J, KNOLS B G J, TAKKEN W. Infection of the malaria mosquito Anopheles gambiae with the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae reduces blood feeding and fecundity [J]. J Invertebr Pathol, 2006, 91(1): 43 − 49. doi:  10.1016/j.jip.2005.10.006
    [4] HOWARD A F V, N’GUESSAN R, KOENRAADT C J M, et al. The entomopathogenic fungus Beauveria bassiana reduces instantaneous blood feeding in wild multi-insecticide-resistant Culex quinquefasciatus mosquitoes in Benin, West Africa [J]. Parasit Vectors, 2010, 3(1): 87. doi:  10.1186/1756-3305-3-87
    [5] ANSARI M A, BUTT T M. Influence of the application methods and doses on the susceptibility of black vine weevil larvae Otiorhynchus sulcatus to Metarhizium anisopliae in field-grown strawberries [J]. BioControl, 2013, 58(2): 257 − 267. doi:  10.1007/s10526-012-9491-x
    [6] IBRAHIM A A, MOHAMED H F, EL-NAGGAR S E M, et al. Isolation and selection of entomopathogenic fungi as biocontrol agent against the greater wax moth, Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) [J]. Egypt J Biol Pest Control, 2016, 26(2): 249 − 253.
    [7] DERVEAUX S, VANDESOMPELE J, HELLEMANS J. How to do successful gene expression analysis using real-time PCR [J]. Methods, 2010, 50(4): 227 − 230. doi:  10.1016/j.ymeth.2009.11.001
    [8] de JONGE H J M, FEHRMANN R S N, de BONT E S J M, et al. Evidence based selection of housekeeping genes [J]. PLoS One, 2007, 2(9): e898. doi:  10.1371/journal.pone.0000898
    [9] KOZERA B, RAPACZ M. Reference genes in real-time PCR [J]. J Appl Genet, 2013, 54(4): 391 − 406. doi:  10.1007/s13353-013-0173-x
    [10] 符伟, 谢文, 张卓, 等. Bt 毒素诱导下小菜蛾实时定量PCR内参基因的筛选[J]. 昆虫学报, 2012, 55(12): 1406 − 1412.

    FU Wei, XIE Wen, ZHANG Zhuo, et al. Selection of valid reference genes for gene expression studies by quantitative real-time PCR in Plutella xylostella (Lepidotera: Plutellidae) after exposure to Bt toxin [J]. Acta Entomol Sin, 2012, 55(12): 1406 − 1412.
    [11] 冯波, 郭前爽, 毛必鹏, 等. 松墨天牛化学感受组织荧光定量PCR内参基因的鉴定与筛选[J]. 昆虫学报, 2016, 59(4): 427 − 437.

    FENG Bo, GUO Qianshuang, MAO Bipeng, et al. Indetification and selection of valid reference genes for assaying gene expression in the chemosensory tissues of Monochamus alternates (Coleoptera: Cerambycidae) by RT-qPCR [J]. Acta Entomol Sin, 2016, 59(4): 427 − 437.
    [12] 刘金泊, 欧静, 姚富姣, 等. 磷化氢诱导下赤拟谷盗实时定量PCR内参基因的筛选[J]. 农业生物技术学报, 2014, 22(2): 257 − 264. doi:  10.3969/j.issn.1674-7968.2014.02.016

    LIU Jinbo, OU Jing, YAO Fujiao, et al. Identification of appropriate reference genes for gene expression studies by quantitative real-time PCR in Tribolium castaneum after exposure to phosphine [J]. J Agric Boitechnol, 2014, 22(2): 257 − 264. doi:  10.3969/j.issn.1674-7968.2014.02.016
    [13] 杨苓, 胡晓静, 徐志峰, 等. 桃蛀螟实时荧光定量PCR内参基因的筛选[J]. 昆虫学报, 2017, 60(11): 1266 − 1277.

    YANG Ling, HU Xiaojing, XU Zhifeng, et al. Screening of reference genes for qRT-PCR in Conogethes punctiferails (Lepidotera: Crambidae) [J]. Acta Entomol Sin, 2017, 60(11): 1266 − 1277.
    [14] 陶蓉, 李慧, 孙宇航, 等. 美国白蛾内参基因的鉴定及筛选[J]. 林业科学, 2019, 55(9): 111 − 120.

    TAO Rong, LI Hui, SUN Yuhang, et al. Indetification and screening of internal reference genes of Hyphantria cunea (Lepidotera: Arctiidae) [J]. Sci Silv Sin, 2019, 55(9): 111 − 120.
    [15] 张亚波, 吴盼盼, 王鹏, 等. 一株绿僵菌的鉴定及其生物学特性[J]. 林业科学, 2012, 48(12): 134 − 140. doi:  10.11707/j.1001-7488.20121221

    ZHANG Yabo, WU Panpan, WANG Peng, et al. Identification and biological characteristics of a Metarhizium pingshaense strain isolated from Melanotus cribricollis larva [J]. Sci Silv Sin, 2012, 48(12): 134 − 140. doi:  10.11707/j.1001-7488.20121221
    [16] YE Bihuan, ZHANG Yabo, SHU Jinping, et al. RNA-sequencing analysis of fungi-induced transcripts from the bamboo wireworm Melanotus cribricollis (Coleoptera: Elateridae) larvae [J]. PLoS One, 2018, 13(1): e0191187. doi:  10.1371/journal.pone.0191187
    [17] RADONIĆ A, THULKE S, MACKAY I M, et al. Guideline to reference gene selection for quantitative real-time PCR [J]. Biochem Biophys Res Commun, 2004, 313(4): 856 − 862. doi:  10.1016/j.bbrc.2003.11.177
    [18] VANDESOMPELE J, de PRETER K, PATTYN F, et al. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes [J]. Genome Biol, 2002, 3(7): 1 − 11.
    [19] ANDERSEN C L, JENSEN J L, ØRNTOFT T F. Normalization of real-time quantitative reverse transcription-PCR data: a model-based variance estimation approach to identify genes suited for normalization, applied to bladder and colon cancer data sets [J]. Cancer Res, 2004, 64(15): 5245 − 5250. doi:  10.1158/0008-5472.CAN-04-0496
    [20] PFAFFL M W, TICHOPAD A, PRGOMET C, et al. Determination of stable housekeeping genes, differentially regulated target genes and sample integrity: bestkeeper-Excel-based tool using pair-wise correlations [J]. Biotechnol Lett, 2004, 26: 509 − 515. doi:  10.1023/B:BILE.0000019559.84305.47
    [21] 吴建阳, 何冰, 杜玉洁, 等. 利用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件进行内参基因稳定性分析的方法[J]. 现代农业科技, 2017(5): 278 − 281. doi:  10.3969/j.issn.1007-5739.2017.05.174

    WU Jianyang, HE Bing, DU Yujie, et al. Analysis method of systematically evaluating stability of reference genes using geNorm, NormFinder and BestKeeper [J]. Modern Agric Sci Technol, 2017(5): 278 − 281. doi:  10.3969/j.issn.1007-5739.2017.05.174
    [22] LEMAITRE B, HOFFMANN J. The host defense of Drosophila melanogaster [J]. Annu Rev Immunol, 2007, 25(1): 697 − 743. doi:  10.1146/annurev.immunol.25.022106.141615
    [23] VOGEL H, BADAPANDA C, VILCINSKAS A. Identification of immunity-related genes in the burying beetle Nicrophorus vespilloides by suppression subtractive hybridization [J]. Insect Mol Biol, 2011, 20(6): 787 − 800. doi:  10.1111/j.1365-2583.2011.01109.x
    [24] ZHONG Daibin, WANG Meihui, PAI A, et al. Transcription profiling of immune genes during parasite infection in susceptible and resistant strains of the flour beetles (Tribolium castaneum) [J]. Exp Parasitol, 2013, 134(1): 61 − 67. doi:  10.1016/j.exppara.2013.01.014
    [25] VOGEL H, BADAPANDA C, KNORR E, et al. RNA sequencing analysis reveals abundant developmental stage-specific and immunity- related genes in the pollen beetle Meligethes aeneus [J]. Insect Mol Biol, 2014, 23(1): 98 − 112. doi:  10.1111/imb.12067
    [26] RHEE S G, KANG S W, CHANG T S. Peroxiredoxin, a novel family of peroxidases [J]. IUBMB Life, 2001, 52(1/2): 35 − 41.
    [27] KAVANAGH K L, JÖRNVALL H, PERSSON B, et al. The SDR superfamily: functional and structural diversity within a family of metabolic and regulatory enzymes [J]. Cell Mol Life Sci, 2008, 65(24): 3895 − 3906. doi:  10.1007/s00018-008-8588-y
  • [1] 刘爱华, 孔婷婷, 张静文, 温俊宝, 焦淑萍.  苹果小吉丁虫对病虫害诱导野苹果树挥发物触角电位和行为反应 . 浙江农林大学学报, 2020, 37(6): 1149-1158. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20190738
    [2] 叶碧欢, 李海波, 叶卫邦, 陈友吾.  锈色粒肩天牛幼虫的COⅠ、COⅡ、Cytb和28S基因片段序列分析 . 浙江农林大学学报, 2020, 37(2): 303-310. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2020.02.015
    [3] 原晓龙, 李娟, 李云琴, 王毅.  1个含有SDR结构域PKS/NRPS基因的克隆 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(6): 1247-1253. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.06.024
    [4] 王千千, 蒋琦妮, 付建新, 董彬, 赵宏波.  不同光周期和温度处理下桂花内参基因的筛选 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(5): 928-934. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.05.011
    [5] 王倩颖, 常鹏杰, 申亚梅, 张超, 董彬, 时宝柱.  景宁木兰热胁迫下实时荧光定量PCR内参基因的筛选 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(5): 935-942. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.05.012
    [6] 赵艺, 徐华潮, 马艳, 史黎央.  虫酰肼和灭幼脲对锈色粒肩天牛氧化酶和解毒酶活性的影响 . 浙江农林大学学报, 2018, 35(1): 174-177. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2018.01.023
    [7] 石林, 吴瑗, 巴少波, 刘正奎, 陈琳, 王磊, 邵春艳, 孙静, 周莹姗, 王晓杜, 宋厚辉.  猪圆环病毒2型Taqman探针法实时荧光定量PCR检测方法的建立 . 浙江农林大学学报, 2018, 35(6): 1133-1138. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2018.06.018
    [8] 李娟, 张小斌, 薛皎, 黄俊浩, 吴鸿.  基于Lucid多途径检索的竹林害虫智能诊断系统研建 . 浙江农林大学学报, 2016, 33(1): 122-129. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.01.017
    [9] 李洪滨, 朱诚棋, 周湘, 马良进, 苏秀.  红哺鸡竹异香柱菌的形态学和分子鉴定 . 浙江农林大学学报, 2016, 33(6): 1040-1044. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.06.016
    [10] 于静, 劳秀杰, 陈彦永, 何小江, 代兵, 赵阿勇, 王晓杜, 宋厚辉.  猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测方法的建立 . 浙江农林大学学报, 2016, 33(2): 357-363. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.02.023
    [11] 付建新, 张超, 王艺光, 赵宏波.  桂花组织基因表达中荧光定量PCR内参基因的筛选 . 浙江农林大学学报, 2016, 33(5): 727-733. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.05.001
    [12] 朱致翔, 时浩杰, 雷飞斌, 张传清.  实时荧光定量PCR定量检测山核桃干腐病病菌潜伏侵染量方法的建立 . 浙江农林大学学报, 2016, 33(2): 364-368. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2016.02.024
    [13] 王璇, 马良进, 吕全, 孟娴静, 张星耀.  山核桃干腐病病原菌的鉴定 . 浙江农林大学学报, 2014, 31(2): 238-245. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.02.012
    [14] 郭帅, 徐秋芳, 沈振明, 李松昊, 秦华, 李永春.  雷竹林土壤氨氧化微生物对不同肥料的响应 . 浙江农林大学学报, 2014, 31(3): 343-351. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.03.003
    [15] 张昕, 沈爱华, 林永敬, 王秋芹, 林海萍.  Frankia菌侵染木麻黄与其共生结瘤程序 . 浙江农林大学学报, 2013, 30(5): 669-673. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.05.006
    [16] 龚小峰, 朱云峰, 刘亮, 杨淑贞, 葛晓峰, 甘其兴, 叶建仁, 蒋平.  柳杉瘿瘤病病原菌鉴定 . 浙江农林大学学报, 2011, 28(2): 339-342. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2011.02.027
    [17] 仇金宏, 沈明霞, 丛静华, 李龙国.  基于单目视觉的森林火点实时定位方法 . 浙江农林大学学报, 2010, 27(5): 651-658. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2010.05.003
    [18] 王记祥, 马良进.  虫生真菌在农林害虫生物防治中的应用 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(2): 286-291.
    [19] 李河, 宋光桃, 何末军, 郝艳, 周国英.  巢式PCR检测油茶根腐病菌的研究 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(6): 849-853.
    [20] 徐华潮, 吴鸿, 周云娥, 张慧.  沟金针虫生物学特性及绿僵菌毒力测定 . 浙江农林大学学报, 2002, 19(2): 166-168.
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出版历程
  • 收稿日期:  2020-07-28
  • 修回日期:  2020-11-26
  • 网络出版日期:  2020-12-23

竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
    基金项目:  浙江省自然科学基金资助项目(LQ19C160006);浙江省省属科研院所资助项目(2019F1068-1)
    作者简介:

    叶碧欢,博士,从事森林保护研究。E-mail: 393938188@qq.com

    通信作者: 宋其岩,助理研究员,从事森林培育研究。E-mail: zjlktg@163.com
  • 中图分类号: S763.38

摘要:    目的   筛选平沙绿僵菌Metarhizium pingshaense侵染条件下筛胸梳爪叩甲Melanotus cribricollis幼虫被稳定表达的内参基因,为该竹林金针虫相关基因的表达研究奠定基础。   方法   基于筛胸梳爪叩甲幼虫的转录组数据,利用实时荧光定量PCR扩增特异性引物,分析相关性和扩增效率;利用GeNorm、NormFinder和BestKeeper软件评估筛选出的6个候选内参基因(β-actinGAPDHα-tubulinRPL13αRPS3、RPS27a),并验证其表达稳定性。   结果   GeNorm分析结果显示:PRS27aRPS3的表达最稳定,随后依次是α-tubulinRPL13αβ-actinGAPDH;最适合的内参基因数目为2。NormFinder分析结果显示:RPL13α的表达最稳定,随后依次是α-tubulinRPS3、RPS27aβ-actinGAPDH。BestKeeper分析结果显示:β-actinGAPDHP值>0.5,不适合作为本试验条件下的内参基因。不同软件分析得出的候选内参排序存在一定差异。综合分析和表达稳定性验证表明PRS27aRPS3是最佳内参基因,6个目的基因的表达水平变化趋势均基本一致。   结论   PRS27aRPS3是研究平沙绿僵菌侵染的竹林金针虫相关基因表达的最佳内参基因。图3表3参27

English Abstract

叶碧欢, 陈友吾, 舒金平, 张威, 张亚波, 李海波, 宋其岩. 竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用[J]. 浙江农林大学学报. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
引用本文: 叶碧欢, 陈友吾, 舒金平, 张威, 张亚波, 李海波, 宋其岩. 竹林金针虫实时荧光定量PCR内参基因的筛选与应用[J]. 浙江农林大学学报. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
YE Bihuan, CHEN Youwu, SHU Jinping, ZHANG Wei, ZHANG Yabo, LI Haibo, SONG Qiyan. Screening and application of reference genes for qRT-PCR in bamboo wireworm[J]. Journal of Zhejiang A&F University. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492
Citation: YE Bihuan, CHEN Youwu, SHU Jinping, ZHANG Wei, ZHANG Yabo, LI Haibo, SONG Qiyan. Screening and application of reference genes for qRT-PCR in bamboo wireworm[J]. Journal of Zhejiang A&F University. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.20200492

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