大血藤RAPD 条件的优化

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大血藤RAPD 条件的优化

金则新 , 李钧敏 , 钟章成

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金则新, 李钧敏, 钟章成. 大血藤RAPD 条件的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(2): 141-145.

引用本文:

金则新, 李钧敏, 钟章成. 大血藤RAPD 条件的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(2): 141-145.

JIN Ze-xin, LI Jun-min, ZHONG Zhang-cheng. Optimization of RAPD conditions of Sargentodoxa cuneata[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(2): 141-145.

Citation:

JIN Ze-xin, LI Jun-min, ZHONG Zhang-cheng. Optimization of RAPD conditions of Sargentodoxa cuneata[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(2): 141-145.

大血藤RAPD 条件的优化

1.
台州学院生物系, 浙江临海 317000;
2.
西南师范大学生命科学学院, 重庆北碚 400715

基金项目:

国家自然科学基金资助项目(39870160)

作者简介: 金则新(1960-), 男, 浙江临海人, 教授, 硕士, 从事植物生态学等研究。

通信作者: 金则新(1960-), 男, 浙江临海人, 教授, 硕士, 从事植物生态学等研究。

中图分类号: Q946

Optimization of RAPD conditions of Sargentodoxa cuneata

1.
Department of Biology , Taizhou University , Linhai 317000, Zhejiang , China;
2.
.Faculty of Life Sciences, Southwest Normal University , Chongqing 400715 , China

Funds:

国家自然科学基金资助项目(39870160)

摘要: 在进行大血藤遗传多样分析时, 首先要建立大血藤RAPD 反应优化体系, 有必要就反应条件进行探索。以改进SDS 法抽提藤本药用植物大血藤叶片总DNA , 进行随机扩增多态DNA (RAPD)分析, 分别测试了镁离子、dNTP 、模板DNA 含量、引物浓度、DNA 聚合酶量和牛血清白蛋白浓度对反应结果的影响。通过各因子的组合研究, 得出大血藤RAPD 分析较适宜的扩增条件是:15 L PCR 反应体积, 1 Taq 酶配套缓冲液(10 mmolL-1 TrisHCl pH 9.0 , 50 mmolL-1 KCl , 0.1 %Triton X-100 , 1.5 mmolL-1 MgCl2);25.01 10-9mols-1 Taq 酶(上海华美公司);10 ng 模板DNA ;15 pmol 引物(上海Sangon 公司);2 gL-1 BSA ;dATP ,dCTP ,dGTP 和dTTP 各0.15 mmolL-1 。图4 表2 参8
- 大血藤 /
- RAPD /
- 化学成分 /
- 药用植物
Abstract: The optimized system used in RAPD reaction of Sargentodoxa cuneata must be established before analyzing the genetic diversity of Sargentodoxa cuneata .It is necessary to explore the reaction conditions .The genomic DNA of Sargentodoxa cuneata is extracted with improved SDS method and RAPD amplification is carried out .The effect of content of Mg , Dutp , DNA templates , primers and DNA polymerase on experimental results is tested and the optimal reaction system of RAPD for Sargentodoxa cuneata is determined as follows :1 Taq polymerase corresponding buffer (10 mmolL-1Tris HCl pH 9.0 , 50 mmolL-1KCl , 0.1 % Triton X-100 , 1.5 mmolL-1MgCl2), 25.01 10-9mols-1Taq DNA polymerase , 10 ng template DNA , 15 pmol primer , 2.00 gL-1BSA .0.15 mmolL-1dATP , dCTP , dGTP , dTTP for each in total 15 L reaction volume .[ Ch , 4 fig .2 tab .8 ref .]
- Sargentodoxa cuneata /
- RAPD /
- chemical composition /
- medicinal plant

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链接本文:
https://zlxb.zafu.edu.cn/article/id/1822

https://zlxb.zafu.edu.cn/article/zjnldxxb/2003/2/141

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大血藤RAPD 条件的优化

1. 台州学院生物系, 浙江临海 317000;

2. 西南师范大学生命科学学院, 重庆北碚 400715

基金项目:

国家自然科学基金资助项目(39870160)

作者简介:
金则新(1960-), 男, 浙江临海人, 教授, 硕士, 从事植物生态学等研究。

通信作者: 金则新(1960-), 男, 浙江临海人, 教授, 硕士, 从事植物生态学等研究。

收稿日期: 2002-08-02
修回日期: 2003-01-13
刊出日期: 2003-06-20

中图分类号: Q946

关键词:

摘要: 在进行大血藤遗传多样分析时, 首先要建立大血藤RAPD 反应优化体系, 有必要就反应条件进行探索。以改进SDS 法抽提藤本药用植物大血藤叶片总DNA , 进行随机扩增多态DNA (RAPD)分析, 分别测试了镁离子、dNTP 、模板DNA 含量、引物浓度、DNA 聚合酶量和牛血清白蛋白浓度对反应结果的影响。通过各因子的组合研究, 得出大血藤RAPD 分析较适宜的扩增条件是:15 L PCR 反应体积, 1 Taq 酶配套缓冲液(10 mmolL-1 TrisHCl pH 9.0 , 50 mmolL-1 KCl , 0.1 %Triton X-100 , 1.5 mmolL-1 MgCl2);25.01 10-9mols-1 Taq 酶(上海华美公司);10 ng 模板DNA ;15 pmol 引物(上海Sangon 公司);2 gL-1 BSA ;dATP ,dCTP ,dGTP 和dTTP 各0.15 mmolL-1 。图4 表2 参8

English Abstract

金则新, 李钧敏, 钟章成. 大血藤RAPD 条件的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(2): 141-145.

引用本文:

金则新, 李钧敏, 钟章成. 大血藤RAPD 条件的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(2): 141-145.

JIN Ze-xin, LI Jun-min, ZHONG Zhang-cheng. Optimization of RAPD conditions of Sargentodoxa cuneata[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(2): 141-145.

Citation:

JIN Ze-xin, LI Jun-min, ZHONG Zhang-cheng. Optimization of RAPD conditions of Sargentodoxa cuneata[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(2): 141-145.

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