山核桃AFLP实验技术体系的建立

郭金剑; 池伟; 赵鑫珠; 王丽; 曾燕如; 张秋月

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山核桃AFLP实验技术体系的建立

郭金剑 , 池伟 , 赵鑫珠 , 王丽 , 曾燕如 , 张秋月

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郭金剑, 池伟, 赵鑫珠, 王丽, 曾燕如, 张秋月. 山核桃AFLP实验技术体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(4): 532-537.

引用本文:

郭金剑, 池伟, 赵鑫珠, 王丽, 曾燕如, 张秋月. 山核桃AFLP实验技术体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(4): 532-537.

GUO Jin-jian, CHI Wei, ZHAO Xin-zhu, WANG Li, ZENG Yan-ru, ZHANG Qiu-yue. An AFLP analysis system for Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(4): 532-537.

Citation:

GUO Jin-jian, CHI Wei, ZHAO Xin-zhu, WANG Li, ZENG Yan-ru, ZHANG Qiu-yue. An AFLP analysis system for Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(4): 532-537.

山核桃AFLP实验技术体系的建立

1.
浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室，浙江临安 311300;
2.
浙江世界贸易中心长乐实业有限公司，浙江临安 311300;
3.
浙江林学院天则山核桃科技开发有限公司，浙江临安 311300

详细信息

通信作者: 曾燕如

中图分类号: S718.46

An AFLP analysis system for Carya cathayensis

1.
The Key Laboratory for Modern Silvicultural Technology of Zhejiang Province，Zhejiang Forestry College，Lin’an 311300，Zhejiang，China;
2.
Changle Co. Ltd，Zhejiang World Trade Center，Lin’an 311300，Zhejiang，China;
3.
Tianze Science and Technology Development Co. Ltd. for Hickory，Zhejiang Forestry College，Lin’an 311300，Zhejiang， China

More Information

Corresponding author: ZENG Yan-ru

摘要: 以充分展开的山核桃Carya cathayensis嫩叶为材料，利用改良CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）法与CTAB裂解?鄄硅珠吸附法提取山核桃总DNA，对适合于山核桃叶片的AFLP（扩增片段长度多态性）分析体系进行了摸索。结果表明：①改良CTAB法适用于从山核桃叶中提取高质量的DNA，提取的DNA可用于AFLP的分析；②采用EcoR I/MseⅠ酶切组合，酶切连接一步法与两步法的效果没有明显的差异，但一步法操作更为简便；③适合于山核桃叶AFLP分析的引物组合为E-ACT + M-CAT，E-ACT + M-CTG，E-ACG + M-CAT，E-ACG + M-CTG。扩增产物经60 g·L－1变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后进行银染，条带信号强度一致性好，条带分布均匀、清晰，分辨率较高。图6表3参17
- 植物学 /
- 山核桃 /
- DNA提取 /
- 扩增片段长度多态性（AFLP）
Abstract: Total DNA was extracted from young，fully opened leaves of Carya cathayensis（hickory） by an improved cetyl trimethylammonium bromide（CTAB） method and a CTAB-silicon method，based on which an amplified fragment length polymorphism（AFLP）analysis system for hickory was developed. An electrophoresis was used on the amplified products in a 6% denatured polyacrylamide gel，followed by silver staining，with clearly identified bands shown. Specifically：（1）the improved CTAB method was appropriate for DNA extraction from hickory leaves with extracted DNA qualified for AFLP analysis；（2）with a combi-nation of EcoRⅠand MseⅠfor enzyme cutting，the results were the same for the one-step method combining enzyme cutting and adaptor ligation and the two-step method which separated them with the one-step method being much easier；and （3）there were four primer pairs suitable for this AFLP analysis，namely E-ACT + M-CAT，E-ACG + M-CAT，E-ACG + M-CAT，and E-ACG + M-ATG. ［Ch，6 fig. 3 tab. 17 ref.］
- botany /
- Carya cathayensis（hickory） /
- extraction of DNA /
- amplified fragment length polymorphism （AFLP）

[1]	陈文充, 贾宁, 董昂, 闫道良, 曾燕如. 山核桃甲基化敏感扩增多态体系的建立与甲基化初步分析 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(3): 468-478. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.03.006
[2]	何国庆, 俞春莲, 饶盈, 章富阳, 沈晓飞, 黄坚钦, 刘力, 夏国华. 山核桃果实成熟过程中矿质元素及脂肪酸组分变化 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(6): 1208-1216. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.06.019
[3]	李顺福, 胡恒康, 张秋露, 徐艳玲, 张启香. 基于ISSR分子标记技术的山核桃幼胚DNA甲基化初步研究 . 浙江农林大学学报, 2014, 31(4): 521-527. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.04.005
[4]	伏建国, 刘金良, 杨晓军, 安榆林, 骆嘉言. 进口黄檀属木材DNA提取与分子鉴定方法初步研究 . 浙江农林大学学报, 2013, 30(4): 627-632. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.04.025
[5]	伏建国, 刘金良, 杨晓军, 安榆林, 骆嘉言. 分子生物学技术应用于木材识别的研究进展 . 浙江农林大学学报, 2013, 30(3): 438-443. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.03.022
[6]	周生财, 黄华宏, 童再康, 吴小林. 4种楠木AFLP反应体系优化建立 . 浙江农林大学学报, 2013, 30(5): 789-796. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.05.024
[7]	杨希宏, 黄有军, 陈芳芳, 黄坚钦. 山核桃FLOWERING LOCUS C同源基因鉴定与表达分析 . 浙江农林大学学报, 2013, 30(1): 1-8. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2013.01.001
[8]	何沙娥, 张智俊. 适用于竹林土壤PCR-DGGE分析用的微生物总DNA提取及纯化方法 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(2): 164-168.
[9]	马良进, 吴美卿, 苏秀, 陈安良, 张立钦. 山核桃外果皮提取物活体抑菌活性 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(5): 620-624.
[10]	万俊丽, 黄坚钦, 夏国华, 张启香, 黄丽春. 山核桃幼胚不定芽的诱导 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(5): 762-766.
[11]	郑炳松, 陈苗, 褚怀亮, 艾雪, 黄有军, 李雪芹, 黄坚钦. 用cDNA-AFLP技术分析山核桃嫁接过程中的CcARF基因表达 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(4): 467-472.
[12]	黄有军, 周丽, 陈芳芳, 周秦, 黄坚钦, 黄敏仁, 王明庥. 山核桃成花过程基因表达的cDNA-AFLP分析 . 浙江农林大学学报, 2009, 26(3): 297-301.
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山核桃AFLP实验技术体系的建立

1. 浙江林学院浙江省现代森林培育技术重点实验室，浙江临安 311300;

2. 浙江世界贸易中心长乐实业有限公司，浙江临安 311300;

3. 浙江林学院天则山核桃科技开发有限公司，浙江临安 311300

通信作者: 曾燕如

刊出日期: 2008-08-20

中图分类号: S718.46

关键词:

摘要: 以充分展开的山核桃Carya cathayensis嫩叶为材料，利用改良CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）法与CTAB裂解?鄄硅珠吸附法提取山核桃总DNA，对适合于山核桃叶片的AFLP（扩增片段长度多态性）分析体系进行了摸索。结果表明：①改良CTAB法适用于从山核桃叶中提取高质量的DNA，提取的DNA可用于AFLP的分析；②采用EcoR I/MseⅠ酶切组合，酶切连接一步法与两步法的效果没有明显的差异，但一步法操作更为简便；③适合于山核桃叶AFLP分析的引物组合为E-ACT + M-CAT，E-ACT + M-CTG，E-ACG + M-CAT，E-ACG + M-CTG。扩增产物经60 g·L－1变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后进行银染，条带信号强度一致性好，条带分布均匀、清晰，分辨率较高。图6表3参17

English Abstract

An AFLP analysis system for Carya cathayensis

1. The Key Laboratory for Modern Silvicultural Technology of Zhejiang Province，Zhejiang Forestry College，Lin’an 311300，Zhejiang，China;

2. Changle Co. Ltd，Zhejiang World Trade Center，Lin’an 311300，Zhejiang，China;

3. Tianze Science and Technology Development Co. Ltd. for Hickory，Zhejiang Forestry College，Lin’an 311300，Zhejiang， China

Corresponding author: ZENG Yan-ru

Publish Date: 2008-08-20

Keywords:

botany /
Carya cathayensis（hickory） /
extraction of DNA /
amplified fragment length polymorphism （AFLP）

Abstract: Total DNA was extracted from young，fully opened leaves of Carya cathayensis（hickory） by an improved cetyl trimethylammonium bromide（CTAB） method and a CTAB-silicon method，based on which an amplified fragment length polymorphism（AFLP）analysis system for hickory was developed. An electrophoresis was used on the amplified products in a 6% denatured polyacrylamide gel，followed by silver staining，with clearly identified bands shown. Specifically：（1）the improved CTAB method was appropriate for DNA extraction from hickory leaves with extracted DNA qualified for AFLP analysis；（2）with a combi-nation of EcoRⅠand MseⅠfor enzyme cutting，the results were the same for the one-step method combining enzyme cutting and adaptor ligation and the two-step method which separated them with the one-step method being much easier；and （3）there were four primer pairs suitable for this AFLP analysis，namely E-ACT + M-CAT，E-ACG + M-CAT，E-ACG + M-CAT，and E-ACG + M-ATG. ［Ch，6 fig. 3 tab. 17 ref.］

郭金剑, 池伟, 赵鑫珠, 王丽, 曾燕如, 张秋月. 山核桃AFLP实验技术体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(4): 532-537.

引用本文:

郭金剑, 池伟, 赵鑫珠, 王丽, 曾燕如, 张秋月. 山核桃AFLP实验技术体系的建立[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(4): 532-537.

GUO Jin-jian, CHI Wei, ZHAO Xin-zhu, WANG Li, ZENG Yan-ru, ZHANG Qiu-yue. An AFLP analysis system for Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(4): 532-537.

Citation:

GUO Jin-jian, CHI Wei, ZHAO Xin-zhu, WANG Li, ZENG Yan-ru, ZHANG Qiu-yue. An AFLP analysis system for Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(4): 532-537.