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光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化

陈争 姜小凤 童再康

陈争, 姜小凤, 童再康. 光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
引用本文: 陈争, 姜小凤, 童再康. 光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
CHEN Zheng, JIANG Xiao-feng, TONG Zai-kang. Optimization of EST-SSR PCR reaction system for Betula luminifera[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
Citation: CHEN Zheng, JIANG Xiao-feng, TONG Zai-kang. Optimization of EST-SSR PCR reaction system for Betula luminifera[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023

光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
详细信息
    通信作者: 童再康

Optimization of EST-SSR PCR reaction system for Betula luminifera

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    Corresponding author: TONG Zai-kang
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出版历程
  • 收稿日期:  2011-10-26
  • 修回日期:  2012-02-22
  • 刊出日期:  2012-12-20

光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
    通信作者: 童再康

摘要: 为获得稳定的聚合酶链式反应(PCR)产物,采用正交设计L25(56)对光皮桦Betula luminifera表达序列标签-简单重复序列聚合酶链式反应(EST-SSR PCR)反应体系中的5个因素:DNA模板浓度,引物浓度,镁离子(Mg2+)浓度,三磷酸碱基脱氧核苷酸(dNTPs)浓度和DNA聚合酶量进行优化,每个因素设计5个水平。优化试验结果表明:光皮桦EST-SSR最佳PCR反应体系:4.0 mgL-1DNA模板,0.500 molL-1引物,1.250 mmolL-1 Mg2+,0.250 mmolL-1 dNTPs,0.072 5 16.67 mkatL-1 rTaq酶。通过梯度PCR试验筛选得到相应引物的最佳退火温度。对优化出的EST-SSR PCR反应体系进行稳定性检测,结果均能获得稳定、清晰可辨的DNA谱带。图6表3参15

English Abstract

陈争, 姜小凤, 童再康. 光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
引用本文: 陈争, 姜小凤, 童再康. 光皮桦EST-SSR PCR反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
CHEN Zheng, JIANG Xiao-feng, TONG Zai-kang. Optimization of EST-SSR PCR reaction system for Betula luminifera[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023
Citation: CHEN Zheng, JIANG Xiao-feng, TONG Zai-kang. Optimization of EST-SSR PCR reaction system for Betula luminifera[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2012, 29(6): 960-965. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2012.06.023

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