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银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化

曹福亮 王国霞 李广平 花喆斌

曹福亮, 王国霞, 李广平, 花喆斌. 银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(2): 186-190.
引用本文: 曹福亮, 王国霞, 李广平, 花喆斌. 银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(2): 186-190.
CAO Fu-liang, WANG Guo-xia, LI Guang-ping, HUA Zhe-bin. Optimizing the inter simple sequence repeat(ISSR) reaction system with Gingko biloba[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(2): 186-190.
Citation: CAO Fu-liang, WANG Guo-xia, LI Guang-ping, HUA Zhe-bin. Optimizing the inter simple sequence repeat(ISSR) reaction system with Gingko biloba[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(2): 186-190.

银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化

基金项目: 

“十一五”国家科技支撑项目(2006BAD18B0301)

详细信息
    作者简介: 曹福亮,教授,博士生导师,从事经济林等研究。E-mail:samcao@njfu.edu.cn
  • 中图分类号: S718.46

Optimizing the inter simple sequence repeat(ISSR) reaction system with Gingko biloba

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出版历程
  • 收稿日期:  2007-02-01
  • 修回日期:  2007-11-09
  • 刊出日期:  2008-04-10

银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化

    基金项目:

    “十一五”国家科技支撑项目(2006BAD18B0301)

    作者简介:

    曹福亮,教授,博士生导师,从事经济林等研究。E-mail:samcao@njfu.edu.cn

  • 中图分类号: S718.46

摘要: 为了对影响银杏Gingko biloba简单序列重复区间扩增-聚合酶链式反应(ISSR-PCR)扩增反应体系的因素进行优化,采用ISSR-PCR扩增技术和UVP凝胶电泳成像技术对模板DNA浓度、Taq酶用量、引物用量、dNTP的用量以及退火温度等因素进行筛选和优化。筛选优化后的反应条件:Taq酶0.3 μg,2 μL 10×Buffer(含15 mmol·L-1MgCl2),模板DNA 40 ng,dNTP 0.2 mmol·L-1,引物0.5 μmol·L-1,Mg2+1.5 mmol·L-1。PCR扩增程序:94℃变性5 min,然后进行38个循环:94℃变性30 s,48~53℃(根据引物而定)退火30 s,72℃延伸1 min;最后72℃延伸10 min,4℃终止反应。上述反应条件可广泛应用于银杏的遗传多样性分析、遗传育种和转基因等方面的研究。

English Abstract

曹福亮, 王国霞, 李广平, 花喆斌. 银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(2): 186-190.
引用本文: 曹福亮, 王国霞, 李广平, 花喆斌. 银杏ISSR-PCR扩增反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2008, 25(2): 186-190.
CAO Fu-liang, WANG Guo-xia, LI Guang-ping, HUA Zhe-bin. Optimizing the inter simple sequence repeat(ISSR) reaction system with Gingko biloba[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(2): 186-190.
Citation: CAO Fu-liang, WANG Guo-xia, LI Guang-ping, HUA Zhe-bin. Optimizing the inter simple sequence repeat(ISSR) reaction system with Gingko biloba[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2008, 25(2): 186-190.

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