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毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化

王超莉 张智俊 屈亚平 王蕾

王超莉, 张智俊, 屈亚平, 王蕾. 毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
引用本文: 王超莉, 张智俊, 屈亚平, 王蕾. 毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
WANG Chaoli, ZHANG Zhijun, QU Yaping, WANG Lei. Cloning, expression and purification of pyruvate, orthophosphate dikinase regulatory proteins from Phyllostachys edulis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
Citation: WANG Chaoli, ZHANG Zhijun, QU Yaping, WANG Lei. Cloning, expression and purification of pyruvate, orthophosphate dikinase regulatory proteins from Phyllostachys edulis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014

毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
基金项目: 

国家自然科学基金资助项目(31270715);浙江省自然科学基金资助项目(LY14C160009)

详细信息
    作者简介: 王超莉,从事生物技术与种质创新研究。
    通信作者: 张智俊,副教授,博士,从事生物技术与种质创新研究。
  • 中图分类号: S718.3

Cloning, expression and purification of pyruvate, orthophosphate dikinase regulatory proteins from Phyllostachys edulis

Funds: 

国家自然科学基金资助项目(31270715);浙江省自然科学基金资助项目(LY14C160009)

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  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2014-11-28
  • 修回日期:  2015-01-09
  • 刊出日期:  2015-10-20

毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化

doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
    基金项目:

    国家自然科学基金资助项目(31270715);浙江省自然科学基金资助项目(LY14C160009)

    作者简介:

    王超莉,从事生物技术与种质创新研究。

    通信作者: 张智俊,副教授,博士,从事生物技术与种质创新研究。
  • 中图分类号: S718.3

摘要: 丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白(pyruvate, orthophosphate dikinase regulatory proteins, RP)是通过调控丙酮酸磷酸双激酶(pyruvate, orthophosphate dikinase,PPDK)参与C4途径光合碳循环途径。毛竹Phyllostachys edulis作为一种重要的经济竹种,分析克隆RP基因对于竹类植物光合作用的研究具有重大理论和应用价值。通过逆转录实时聚合酶链式反应(RT-PCR)成功克隆得到毛竹PeRP1,该基因cDNA全长1 275 bp,编码425个氨基酸;经生物信息学预测,该蛋白属于kinase-PPPase超家族,主要含有UDF 299保守结构域;经多序列比对发现毛竹PeRP1蛋白与C3植物中RP1亲缘关系较近,而与C4植物亲缘关系较远。为了研究PeRP1的蛋白质结构,我们将PeRP1蛋白进行原核表达,利用Ni-NTA树脂亲和层析结合分子筛(SEC)层析的方法纯化得到了PeRP1重组蛋白。SEC纯化的结果表明:PeRP1蛋白在溶液中主要以多聚体形式存在,二聚体及单体含量较少,推测PeRP1蛋白可能以多聚体形式参与调控PPDK蛋白。这为今后研究该蛋白的结构与功能打下了良好基础。图7参15

English Abstract

王超莉, 张智俊, 屈亚平, 王蕾. 毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
引用本文: 王超莉, 张智俊, 屈亚平, 王蕾. 毛竹丙酮酸磷酸双激酶调节蛋白基因克隆、原核表达及纯化[J]. 浙江农林大学学报, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
WANG Chaoli, ZHANG Zhijun, QU Yaping, WANG Lei. Cloning, expression and purification of pyruvate, orthophosphate dikinase regulatory proteins from Phyllostachys edulis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014
Citation: WANG Chaoli, ZHANG Zhijun, QU Yaping, WANG Lei. Cloning, expression and purification of pyruvate, orthophosphate dikinase regulatory proteins from Phyllostachys edulis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2015, 32(5): 749-755. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2015.05.014

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