山核桃RAPD 反应体系的优化

王正加; 黄坚钦; 郭传友; 杨萍; 王华芳

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山核桃RAPD 反应体系的优化

王正加 , , 黄坚钦 , 郭传友 , 杨萍 , 王华芳

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王正加, 黄坚钦, 郭传友, 杨萍, 王华芳. 山核桃RAPD 反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(4): 429-433.

引用本文:

王正加, 黄坚钦, 郭传友, 杨萍, 王华芳. 山核桃RAPD 反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(4): 429-433.

WANG Zheng-jia, HUANG Jian-qin, GUO Chuan-you, YANG Ping, WANG Hua-fang. The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(4): 429-433.

Citation:

WANG Zheng-jia, HUANG Jian-qin, GUO Chuan-you, YANG Ping, WANG Hua-fang. The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(4): 429-433.

山核桃RAPD 反应体系的优化

1.
北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;
2.
浙江林学院生命科学学院, 浙江临安 311300;
3.
南京林业大学森林资源与环境学院, 江苏南京 210037

基金项目:

浙江省科学技术厅重大招标项目(0211025); 浙江省自然科学基金重大项目(ZA0208); 杭州市科技局重大攻关项目 (2002112A12)

详细信息

作者简介: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com;王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

通信作者: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。; 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

中图分类号: S718.46

The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis

1.
School of Biological Science and Biotechnology , Beijing Forestry University , Beijing 10083, China;
2.
School of Life Sciences, Zhejiang Forestry College , Lin’an 311300, Zhejiang , China;
3.
College of Forest Resources and Environment , Nanjing Forestry University , Nanjing 210037, Jiangsu, China

Funds:

浙江省科学技术厅重大招标项目(0211025); 浙江省自然科学基金重大项目(ZA0208); 杭州市科技局重大攻关项目 (2002112A12)

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Author Bio:
王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

Corresponding author: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

摘要: 建立山核桃RAPD 反应优化体系是进行山核桃遗传多样性分析的前提。通过对影响PCR 扩增结果的主要因子的组合研究, 确定了山核桃Carya cathayensis 的最适反应体系和扩增程序, 即在20 L 反应体系中, 含2.5 mgL-1 (50 ng)模板, 2.0 L 10 Buffer , 16.67pmols-1Taq DNA 聚合酶;各0.2 mmolL-1dNTPs , 3.0 mmolL-1MgCl2 , 0.3 molL-1引物。扩增程序为:94 ℃预变性300 s , 94 ℃变性30 s , 38 ℃退火30 s , 72 ℃链延伸90 s , 38 次循环, 72 ℃后延伸420 s 。图5 表2 参6
- 林木遗传育种学 /
- 山核桃 /
- 随机扩增多态性DNA (RAPD) /
- 反应体系 /
- 优化
Abstract: The optimized system used in RAPD reaction of Carya cathayensis must be established before analying the genetic diversity ofCarya cathayensis .It is necessary to explore the reaction conditions and system .The optimal reaction mixture and amplification procedure of RAPD in Carya cathayensis were studied .The result showed that each 20 L amplification reaction solution was consisted of 2.5mgL-1 (50 ng)template DNA , 2.0L 10 Buffer , 16.67 pmols-1Taq DNA polymerase , each 0.2mmolL-1dNTPs , 2.4 mmolL-1MgCl2 , 0.15 10-3 mmolL-1 primer .The PCR amplification program is predenature at 94 ℃for 300 s , followed by denature at 94 ℃ 30 s , annealing 38 ℃for 30 s , extension 72 ℃ for 90 s , cycling 38 times , last extension 72 ℃ 420 s . [ Ch , 5 fig .2 tab .6 ref .]
- forest tree genetics and breeding /
- Carya cathayensis /
- RAPD /
- reaction system /
- optimization

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[2]	马艳, 史黎央, 赵艺, 徐华潮. 云斑天牛对不同受害状态下山核桃挥发物成分的触角电位和行为反应 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(3): 437-443. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.03.002
[3]	陈文充, 贾宁, 董昂, 闫道良, 曾燕如. 山核桃甲基化敏感扩增多态体系的建立与甲基化初步分析 . 浙江农林大学学报, 2019, 36(3): 468-478. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2019.03.006
[4]	田风光, 何颖飞, 段承俐. 七叶一枝花ISSR-PCR反应体系的建立 . 浙江农林大学学报, 2014, 31(6): 983-989. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.06.023
[5]	李顺福, 胡恒康, 张秋露, 徐艳玲, 张启香. 基于ISSR分子标记技术的山核桃幼胚DNA甲基化初步研究 . 浙江农林大学学报, 2014, 31(4): 521-527. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2014.04.005
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[8]	李元春, 沈林, 曾燕如. 山核桃SRAP体系的建立及与RAPD和ISSR标记的比较 . 浙江农林大学学报, 2011, 28(3): 505-512. doi: 10.11833/j.issn.2095-0756.2011.03.025
[9]	郭金剑, 池伟, 赵鑫珠, 王丽, 曾燕如, 张秋月. 山核桃AFLP实验技术体系的建立 . 浙江农林大学学报, 2008, 25(4): 532-537.
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链接本文:
https://zlxb.zafu.edu.cn/article/id/1903

https://zlxb.zafu.edu.cn/article/zjnldxxb/2003/4/429

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山核桃RAPD 反应体系的优化

1. 北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;

2. 浙江林学院生命科学学院, 浙江临安 311300;

3. 南京林业大学森林资源与环境学院, 江苏南京 210037

基金项目:

浙江省科学技术厅重大招标项目(0211025); 浙江省自然科学基金重大项目(ZA0208); 杭州市科技局重大攻关项目 (2002112A12)

作者简介:
王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

通信作者: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。; 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

收稿日期: 2003-07-04
修回日期: 2003-09-24
刊出日期: 2003-12-20

中图分类号: S718.46

关键词:

摘要: 建立山核桃RAPD 反应优化体系是进行山核桃遗传多样性分析的前提。通过对影响PCR 扩增结果的主要因子的组合研究, 确定了山核桃Carya cathayensis 的最适反应体系和扩增程序, 即在20 L 反应体系中, 含2.5 mgL-1 (50 ng)模板, 2.0 L 10 Buffer , 16.67pmols-1Taq DNA 聚合酶;各0.2 mmolL-1dNTPs , 3.0 mmolL-1MgCl2 , 0.3 molL-1引物。扩增程序为:94 ℃预变性300 s , 94 ℃变性30 s , 38 ℃退火30 s , 72 ℃链延伸90 s , 38 次循环, 72 ℃后延伸420 s 。图5 表2 参6

English Abstract

The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis

1. School of Biological Science and Biotechnology , Beijing Forestry University , Beijing 10083, China;

2. School of Life Sciences, Zhejiang Forestry College , Lin’an 311300, Zhejiang , China;

3. College of Forest Resources and Environment , Nanjing Forestry University , Nanjing 210037, Jiangsu, China

Funds:

浙江省科学技术厅重大招标项目(0211025); 浙江省自然科学基金重大项目(ZA0208); 杭州市科技局重大攻关项目 (2002112A12)

Author Bio:
王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

Corresponding author: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

Received Date: 2003-07-04
Rev Recd Date: 2003-09-24
Publish Date: 2003-12-20

Keywords:

Abstract: The optimized system used in RAPD reaction of Carya cathayensis must be established before analying the genetic diversity ofCarya cathayensis .It is necessary to explore the reaction conditions and system .The optimal reaction mixture and amplification procedure of RAPD in Carya cathayensis were studied .The result showed that each 20 L amplification reaction solution was consisted of 2.5mgL-1 (50 ng)template DNA , 2.0L 10 Buffer , 16.67 pmols-1Taq DNA polymerase , each 0.2mmolL-1dNTPs , 2.4 mmolL-1MgCl2 , 0.15 10-3 mmolL-1 primer .The PCR amplification program is predenature at 94 ℃for 300 s , followed by denature at 94 ℃ 30 s , annealing 38 ℃for 30 s , extension 72 ℃ for 90 s , cycling 38 times , last extension 72 ℃ 420 s . [ Ch , 5 fig .2 tab .6 ref .]

王正加, 黄坚钦, 郭传友, 杨萍, 王华芳. 山核桃RAPD 反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(4): 429-433.

引用本文:

王正加, 黄坚钦, 郭传友, 杨萍, 王华芳. 山核桃RAPD 反应体系的优化[J]. 浙江农林大学学报, 2003, 20(4): 429-433.

WANG Zheng-jia, HUANG Jian-qin, GUO Chuan-you, YANG Ping, WANG Hua-fang. The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(4): 429-433.

Citation:

WANG Zheng-jia, HUANG Jian-qin, GUO Chuan-you, YANG Ping, WANG Hua-fang. The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis[J]. Journal of Zhejiang A&F University, 2003, 20(4): 429-433.

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山核桃RAPD 反应体系的优化

作者简介: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com;王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

通信作者: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。; 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis

Author Bio: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

Corresponding author: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

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山核桃RAPD 反应体系的优化

1. 北京林业大学 生物科学与技术学院, 北京 100083; 2. 浙江林学院 生命科学学院, 浙江 临安 311300; 3. 南京林业大学 森林资源与环境学院, 江苏 南京 210037

作者简介: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

通信作者: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。; 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

English Abstract

The optimal reaction system of RAPD in Carya cathayensis

Author Bio: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

Corresponding author: 王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。

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王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

1. 北京林业大学生物科学与技术学院, 北京 100083;

2. 浙江林学院生命科学学院, 浙江临安 311300;

3. 南京林业大学森林资源与环境学院, 江苏南京 210037

作者简介:
王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com

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王正加(1972-), 男, 浙江三门人, 讲师, 从事植物生物技术研究。E-mail: wzhj21@163.com